Дослідження та рекомендації GcMAF

GcMAF (Gc-білковий макрофагальний фактор активації) для лікування раку, ВІЛ та імунних захворювань

Дослідження і посилання

GcMAF (отриманий з білка Ос макрофагального фактора активації)

Для лікування раку, ВІЛ та імунних захворювань

Дослідження і посилання

протокол випробування

14-JUN-2012 стійкість GcMAF в сироватці (PDF)

Н Мукаи, Y юто. Відділення біологічних наук і технологій, Університет Токусіма.

  • Цей експеримент був проведений в Університеті Токушім в Японії в короткостроковому і довгостроковій життя і стабільність фагоцитарної активності макрофагів нашого GcMAFs на 2 полки. щоб продемонструвати покоління. Результати показують, що 2. Покоління GcMAF в сироватці для 1 року 4ºC для 14 днів при кімнатній температурі (близько 20ºC) і 7 днів в 40ºC залишається стабільним.
  • Будь ласка, зверніть увагу, що це дослідження і відповідні результати стосуються тільки GcMAF другого покоління, який підготовлений нашим запатентованим процесом виробництва, Звичайний GcMAF, який отримує за допомогою вітаміну D-спорідненість, не має таку ж стабільності, як і GcMAF другого покоління, так як він має більш високу схильність до окислення. Різниця в стабільності через різні виробничі процеси, а не через сам GcMAF.

друге покоління тест активності фагоцитарної макрофагальної GcMAF

друге покоління GcMAF перевіряється на фагоцитарну активність макрофагів з використанням макрофагів миші і вівці червоних кров'яних клітин в Університеті Tokushima. Червоні клітини крові опсонізовані і, таким чином позначаються для активованих макрофагів для прийому і руйнування. У опсонірованной клітку можна спостерігати, як пурпурні області в прозорих клітинах. Грунтуючись на цьому спостереженні, ми обчислимо фагоцитоз (проковтування) індекс (PI).

Пурпурові відзначені макрофаги, активовані GcMAF, а потім прийняти опсонірованние червоні кров'яні клітини (тут, в білій фарбі знаків).

Попередні результати проведення експериментів на природних умовах раку мишей

У природних умовах експериментів ракових мишей, що несуть обробляли другого покоління GcMAF і очищеного GcMAF, отриманого за методом доктора Ямамото з використанням сольового розчину у виконанні. 2. Покоління виявилося в цих експериментах, як набагато більш ефективним, як очищений GcMAF поза. (Неопубліковані результати, Університет Токусіма).

Опубліковані дослідження по GcMAF

Разом з дослідниками з Університету GcMAF Tokushima в Японії wiird працює над подальшим розвитком другого покоління GcMAF. Нижче наведені аналітичні звіти про GcMAF, які були опубліковані протягом останнього року 10 з університету Токус і опубліковані в наукових журналах. Дослідження по GcMAF прогресує і приведуть в майбутньому до інших публікацій.

вітамін 2010 D-зв'язуючий білок пригнічує фактор активації макрофагів HCC в SCID мишей

До Накаяма, N Матсуура, Т Kanematsu, Х. Фудзіока, Х. Накаяма, N Матсуура, Kanematsu, Х. Фудзіока.

  • Фон, Ймовірний рецидив гепатоцелюлярної карциноми є найбільшою проблемою для лікування цього. Тому необхідна нова стратегія для лікування захворювання. Метою даного дослідження було вивчення чи вітамін D-зв'язуючий білок макрофагів фактор активації (DBPmaf) може пригнічувати ріст ГЦК.
  • висновок, ДБФ-MAF має принаймні дві нові функції, а саме антиангіогенної активності і руйнування пухлини шляхом активації макрофагів. Отже DBP-MAF є потенційною нової стратегії для лікування ГЦК.

Малюнок 2 представницькі пухлини, взяті з 21 днів після початку введення DBP-MAF. (Доза: 40 нг / кг / день)

 

Зміни Малюнок 3 в обсязі пухлини (п = 10) 21 день після початку лікування. Пухлини росли безконтрольно в контрольній групі, в той час як зростання пухлини тестової групи був значно обмежений.

 

Малюнок 4 кількість мікросудин в межах трансплантованих пухлин HepG2. Кількість мікросудин в пухлинах оброблених мишей була значно нижче, ніж у необроблених пухлин.

 

Коментар автора:

Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) є найбільш поширеними злоякісними пухлинами в усьому світі. Терапевтичні варіанти для лікування ГЦК обмежені і часто поширюються навіть після лікувальних процедур, рецидиви с. Солідні пухлини, в тому числі НСС повинні розробити адекватну мережу судин, таким чином, щоб забезпечити себе їжею. так що ангіогенез пухлини є одним з основних умов для зростання пухлини і проліферації.

Раніше повідомлялося, що вітамін D-зв'язуючий білок (ДБФ), отриманий фактор активації макрофагів є інгібітором ангіогенезу. Це знаходиться на натуральній основі в людському Bach слинної залози лінії клітин раку ByPC-3.

В даному дослідженні в природних умовах, показує, що DBPmaf може зменшити прогресування пухлини xenografierten клітин НСС в SCID мишей. Дослідження в пробірці також показує, що DBP-MAF має, щонайменше, дві біологічні функції; в тому числі антиангіогенної активністю і посилення активації макрофагів.

Анти-ангіогенез є одним з найбільш ефективних методів індукують регресію пухлини або принаймні зупинку зростання. Інші повідомлення підтверджують припущення про те, що DBP-MAF є антиангіогенним і гальмує зростання ГЦКА у мишей.

Звіти для збільшення гепатоцелюлярної карциноми МВС і VEGF рівнів в сироватці і тканини пухлини. Бевацизумаб (Авастин, гуманізувати анти-VEGF моноклональні антитіла миші) використовується в клініці для лікування раку товстої кишки. Деякі дослідження вивчали застосування бевацизумабу в якості єдиного агента для обробки, або в комбінації з цитотоксичною або молекулярно орієнтованими агентами у хворих з прогресуючому ГЦКОМ. Було показано, що DBP-MAF надає свій анти-ангіогенний ефект аналогічно бевацизумаб через інгібування VEGF сигнальний каскад. Показати всі ці результати показують, що DBP-MAF є перспективним інгібітором ангіогенезу, і подальші дослідження в області механізму дії потрібно.

Наші нинішні дослідження показують, що DBP-MAF індукує масивну інфільтрацію макрофагів в трансплантованих клітин НСС і за її межами активованих макрофагів як антиген-що представляють клітини пухлинних антигенів. так що ці макрофаги діють не тільки як вроджені імунні клітини, але також функціонувати як дендритні клітини.

Той факт, що ми не бачили антипроліферативну дію DBP-MAF на клітинах НСС, це вказує на те, що DBP-MAF в основному працює шляхом інгібування ангіогенезу і вбивство пухлинних клітин за допомогою активованих макрофагів.

Ми показали вперше, що лікування мишей SCID з підшкірним призводить HepG2 по DBP-MAF для пригнічення росту пухлини.

2005 Ос білок (вітамін D-зв'язуючий білок): Сс генотипування і GcMAF базова активність

Н Нагасав, Y ють, Х Сасакі, N Окамура, A Муракамі, S Куб, KL Кірк, Н Хорі.

Резюме, Білок Ос (конкретна група-компонент людського (Оси), вітамін D-зв'язуючий білок або Оси-глобулін) мають важливі фізіологічні функції, в той числі участі в транспорті вітаміну D. і його зберігання, очищення позаклітинного G-актин, коефіцієнт посилення активності хемотаксиса з C5a (для нейтрофілів в запаленні і активації макрофагів, опосередкованої GalNAc-модифікованого білка Gc (GcMAF). цей огляд показує структуру і функції білка Gc розглядається особливо з огляду на Gc генотипування і базової активності GcMAF. обговорення стратегії дослідження «GcMAF як мішень для виявлення наркотиків» заснований на наших власних дослідженнях.

2004 Асоціація макрофагів активує фактора (МАФ) базова активність з поліморфізмом в вітамін D-зв'язуючого білка (PDF)

Н Нагасав, S Саки, Y ють, S Куб, Н Хорі.

Резюме, Фон. Сироватка вітамін D-зв'язуючий білок (протеїн Ос або Дади) є високим рівнем експресії білка поліморфного каскадом обробки вуглеводного реакція попередника запалення präparierenden фактора активації макрофагів (GcMAF). Для з'ясування взаємозв'язку між Gc поліморфізмом і базової активністю GcMAF, ми оцінювали фагоцитарну здатність Homo три типи Сс білок Gc1f-1F, Gc1s-1S і Gc2-2 з шляхом обробкою їх вуглеводних частин.

Процес, Ми проводили Gc-типування зразків сироватки людини шляхом ізоелектричного фокусування (IEF). Білок Ос з сироватки крові людини очищав за допомогою афінної хроматографії з 25-гидроксивитамина D3 сефарози. Фагоцитоз Аналіз ГХ з використанням модифікованих білків бети-глюкозидази та сіалідаза був виконаний.

Результати, Аналізуючи матеріал основи GcMAF активності з використанням beta1-4-зв'язок-специфічної галактозидазу з бобів було показано, що фенотип Gc1F-1F містить зв'язок Galbeta1-4GalNAc. Підстава діяльності GcMAF з Gc1F-1F фенотипу була найвищою серед трьох типів Gc гомо.

висновок, Поліморфізм Gc і різноманітність вуглеводів білка Gc є суттєвими для плейотропних ефектів.

2003 характеристика людини від Gc білків, отриманих макрофагального фактора активації (GcMAF) і його функціональної ролі в пухлинної активності макрофагів (PDF)

S Мохамад, Хорі Н, Н Нагасав, К Усуй, Y Юти.

Введення, Макрофаги мають важливе значення для імунної системи організму і відіграють важливу роль в імунній реакції на сигнали загрози. Макрофаги також відомо, що вирішальну роль в протипухлинного імунітету, може проникати в пухлину, і, отже, можна знайти в більшості пухлинних ділянок. Тим часом, білок Ос-сироватка застосовується (також відомий як вітамін-зв'язуючий білок, відомий D3) в зв'язку з мульти-функціональних властивостей як попередника для активації макрофагів фактора. Білок Оса може бути індукованим B-галактозидаза та нейрамінідази, В-клітин Т-клітинами до потужного фактору активації макрофагів (GcMAF), білок з N-ацетілгалактозаміном (GalNAc) іншим становить цукрового компонент перетворюється.

Активовані макрофаги експресують активність пухлини шляхом введення пухлинних клітин, вивільнення активних форм кисню (АФК) і активних форм азоту (RNS), або обох. Ми повідомляли, що на місціМодифікація Gc білка з B-галактозидаза та нейрамінідази, збільшує вивільнення супероксида в тиогликолят від перитонеальних макрофагів мишей. Ямамото і ін. показали можливість використання в якості імуномодулятора GcMAF для лікування раку. Звідси виникає необхідність аналізу на GcMAF. Канан і ін. повідомили про кількісному аналізі GcMAF з сироватки крові людини. Вміст цукру в GcMAF ніколи не досліджували якісно. Тут ми наводимо дослідження по якісному аналізу GcMAF з очищеної сироватки крові людини і його вплив на активність макрофагів.

2003 з Gc білка-фактора активації, отриманий макрофаги (GcMAF): ізоелектричного фокусування візерунків і пухлинна активність (PDF)

S Мохамад, Нагасав H, S Саки, Y ють, Y Накагава, К Кавасіми, Н Хорі.

Фон, Ос білок є попередником Gc білок, отриманий з макрофагів, активує фактора (GcMAF) з трьома фенотипами: Gc1f, Gc1s і Gc2, на основі справжнього електрофоретичної рухливості. Різниця в електрофоретичної рухливості пов'язано з різним пост-трансляційної складу цукрового фрагмента.

Матеріали і методи. Ми порівняли відмінності в електрофоретичної рухливості між білком Gc і GcMAF на основі ізоелектрофокусіровкі методи (ІЕФ). Пухлинна активність макрофагів, оброблених GcMAF оцінювали шляхом спільного культивування з L-929 клітин. Пухлиноподібні механізм був з TNF біопроб та оксид азоту (NO) випуском досліджуваних.

Результати, Різниця в електрофоретичної рухливості білка і GcMAFs Gc могла бути виявлена. Незважаючи на те, пухлинне активність GcMAF оброблених макрофагів було виявлено, не було показано, що не вивільнення TNF і NO.

висновок, Різниця ізоелектричного фокусування рухливість при Сс білка і GcMAF може бути корисно розробити методи виявлення GcMAF. GcMAF збільшилася активність макрофагів пухлини. Проте, ФНП і не вивільняють були залучені в механізм.

2002 пухлинних клітин альфа-N-acetylgalactosaminidase активність і їх участь в GcMAF-асоційованої активації макрофагів (PDF)

S Мохамад, Нагасава Н, Y ють, Н Хорі.

Резюме, Накопичення альфа-N-ацетил-галактозамінідази (альфа-Nagalase) в сироватці крові хворих на рак і деглікозілірованіе білка Gc, який є попередником GcMAF-індукованої активації макрофагів каскаду, що в кінцевому підсумку призводить до імуносупресії в передових ракових хворих була продемонстрована.

Ми досліджували біохімічні показники альфа-Nagalase декількох ліній пухлинних клітин людини. Ми також розглянули для того, щоб вплив на ефективність GcMAF перитонеальних макрофагів мишей. Вони повинні бути отримані в процесі каскаду активації макрофагів, ініційованої GcMAF після активації супероксида.

Питома активність альфа-NaGalases з лінії пухлинних клітин товстої кишки людської HCT116, лінії клітин гепатоми людини HepG2, і нормальних клітин печінки людини (лінії клітин Чанг Лебер) оцінювали з використанням двох видів підкладок; GalNAc альфа-ПНП (екзо- субстрат) і Гал-бета-GalNAc альфа-ПНП (ендо- субстрат).

Пухлина отриманої альфа-Nagalase мала більш високу активність, ніж нормальний альфа-Nagalase на, мала вищу субстратне специфічність до екзо- типу підкладці, як ендо- підкладка і зберегла активність в pH7. GcMAF розширення супероксид виробництва макрофагів миші, в якому попередня обробка пухлинних клітин лизата з GcMAF зменшує активність.

Ми прийшли до висновку, що отримані з пухлини альфа-Nagalase відрізняється в біохімічної характеристиці в порівнянні з нормальним альфа-Nagalase від нормальних клітин печінки Chang. Крім того, отримані з пухлинних клітин альфа-Nagalase зменшує активацію потенцію GcMAF по відношенню до макрофагів.

2002 підготовка білкового походження фактора активації макрофагів Gc (GcMAF) і її структура характеристика і біологічна активність (PDF)

S Мохамад, Нагасава Н, Y ють, Н Хорі.

Резюме, Фон. Ос білок є попередником Gc білок, отриманий макрофагальной активує фактора (GcMAF) в запалення викликано макрофагальной активації каскаду. Індуковані бета-галактозидаза та нейрамінідази, В-клітини Т-клітини перетворять Gc білок GcMAF.

Результати, Ми успішно вилікували Gc білка з сироватки крові людини. GcMAF був виявлений Lektinblotting і показав високу біологічну активність.

висновок, Наші результати підтверджують важливість блоку N-ацетілгалактозамін терміналу в GcMAF-опосередкованого каскаді активації макрофагів і наявність конститутивного GcMAF в сироватці крові людини. Ці попередні дані мають важливе значення для розробки молекулярних GcMAFs.

Інші опубліковані дослідження Gc-MAF

2011 поліморфізм в вітамін D-зв'язуючого білка в якості генетичного фактора ризику в патогенезі ендометріозу (PDF)

K довжина волокна, G Голдерер, Л. Кремсер, Х. Лінднер, B Коффин, Л. Вільдт, B Себеріо.

Резюме, Попередні дослідження показали відсутність запальної реакції у жінок, які enwickeln ендометріозу. Специфічні імунологічні недоліки не можуть бути повністю не пояснені.

мета, Наша мета полягала в тому, щоб визначити відмінності в експресії білка в сироватці крові, а потім блиск на патофізіології ендометріозу ближче.

метод, Перехресне дослідження було проведено в університетській лікарні і оглянув жінок, які зазнали між 2003 і 2005 лапароскопії. Ці пацієнти були жінки у віці років 18-49, які перенесли операцію з-за болю і / або безпліддя або виборної перев'язку труб. Кров збирали предоперационном.

Головний результат дії, Протеом аналіз сироватки проводили двовимірної Differenzgelelektrophorese.

Результати, Ми знайшли 25 білкові плями зі значною різницею в достатку між жінками з ендометріозом і управління, в тому числі білків гострої фази і додаткових компонентів. Кількість вітаміну D-зв'язуючий білок було вище у всіх пулах ендометріозу з коефіцієнтом близько 3 в порівнянні з контрольним басейном. Аналіз специфічного Allelprodukten з використанням нанорозмірних рідинної хроматографії-електророзпиленням іонізації мас-спектрометрії показав, що ГХ * 2-Allelprodukt був більш концентрованим в сироватці басейнах і в окремих зразках перевірки у жінок з ендометріозом. На відміну від GC * 1-Allelprodukt, який легко в потужний фактор макрофагів (Ос білок-похідний фактор активації макрофагів) може бути перетворений, це ОЕ * 2-Allelprodukt практично не існує.

висновки, Ми підозрюємо, що відсутність фагоцитарної функції активації макрофагів з тими, хто носить поліморфізм GC * 2 до імплантату (загальний ендометріозу), створює можливість ендометріоїдних тканини в черевну порожнину. Майбутні дослідження для оцінки конкретних вітаміну D-зв'язуючі білки поліморфізмів як фактори ризику ендометріозу в великих популяціях потрібні жінок.

Коментар автора:

Ендометріоз є поширеним захворюванням жінок репродуктивного віку. Вона зачіпає близько 10% жінок і над 40% жінок з безпліддям. Жінки з ендометріозом можуть мати порушення їх порушень імунної системи і запальних реакцій, так що розвиваються ендометріоїдних уражень.

Наше найбільш вражаюче відкриття змінюється частота певного алеля ДАТ, точніше алелі GC * 2. Вираз GC * 2-Allelprodukts було вище, ніж у контрольній групі в усі ендометріозі басейнах 3-згині.

ДБФ на додаток до тієї ролі, як носій для метаболітів вітаміну D, самого сильного активатора макрофагів у вигляді Ос білка, отриманого макрофагального фактора активації (GcMAF). ГХ * 1-Allelprodukte% глікозовані із загальною швидкістю 10-30 в той час як ГХ * 2-Allelprodukt глікозіліруется зі швидкістю 1-5%. Таким чином, форма білків, кодованих Гй * 1 аллель DBP набагато легше перетворюються в GcMAF, в той час як це навряд чи має місце в кодованому ОМ * 2 аллель.

Ті пацієнти з тільки GC * 2-Allelprodukten непропорційно представлені в групі ендометріозу і мають значно знижену здатність до DBP в GcMAF, щоб перетворити критичну активатор макрофагів.

За результатами нашого дослідження, ми вважаємо, що імунний дефіцит, який, принаймні частково через нездатність GC'2 аллели активувати фагоцитарну функцію макрофагів.

Активація макрофагів за допомогою специфічної імунотерапії в яких торкається жінок може стати основою нової стратегії лікування ендометріозу.

Хабен Сі Фраген?

Просто зв'яжіться з нами.