Informações sobre o teste de Nagalase
1. Resumo
2. O que é "Nagalase"?
3. Como é a inativação do Gc-MAF pela Nagalase?
4. "Teste de Nagalase": o que é isso?
5. Gostaria que o teste Nagalase fosse realizado? Como isso funciona?
6. O que o teste custa e como o teste é liquidado?
7. Gc-MAF produzido artificialmente para o tratamento de doenças
8. Quais outros valores de medição podem ser mais importantes para uma terapia com Gc-MAF?
9. Literatura científica
10. Explicação de termos importantes
11. Sugestões para recuperação de amostras para o teste de Nagalase
12. Notas sobre a centrifugação de monovetas de gel
1. Resumo
- Nagalase é uma enzima cancerígena no metabolismo do açúcar.
- As células tumorais podem formar Nagalase.
- Gc-MAF é um fator ativador de macrófagos (imunoestimulador).
- Gc-MAF é formado a partir de proteína Gc.
- O Nagalase formado por tumor pode impedir a produção do fator imunoestimulador Gc-MAF a partir da proteína Gc.
- O Gc-MAF produzido artificialmente é utilizado como substância imunoestimulante.
- O teste Nagalase é realizado para verificar se um Terapia Gc-MAF ("indicação de terapia") e monitorar o efeito da terapia com Gc-MAF ("monitoramento").
- Outros valores medidos podem ser medidos em um Gc-MAF Terapia: níveis de vitamina D e níveis de cálcio no sangue, a variante genética do receptor de vitamina D e os níveis séricos do receptor uPA solúvel.
2. O que é "Nagalase"?
O chamado "Nagalase"É uma enzima específica do corpo, que desempenha um papel no metabolismo do açúcar. O nome cientificamente correto é "N-acetil-galactosaminidase". Nagalase pode separar determinadas moléculas de açúcar, a saber, a N-acetil-galactosamina, de grandes moléculas.
Yamamoto e colegas mostraram que os tumores aumentam o Nagalase. Consequentemente, também descobriu-se que as doenças tumorais estão associadas a um valor elevado de nagalase no soro ("marcador tumoral"). Maiores valores de Nagalase também foram encontrados em algumas outras doenças.
O Nagalase produzido por tumores foi atribuído um efeito de supressão sobre o sistema imunológico; clinicamente referido como "efeito imunossupressor". A supressão imune mediada por Nagalase em doenças tumorais acredita-se que contribui para o crescimento do tumor existente e a formação de metástases.
O efeito imunossupressor de Nagalase é explicado pelo fato de que Nagalase é a formação do fator imunoestimulador Gc-MAF da proteína Gc. "MAF" significa "Factor de ativação de macrófagos". Os macrófagos são chamados de "fress-cells" da defesa imune.
3. Como é a inativação do Gc-MAF pela Nagalase?
Gc-MAF é formado a partir de proteína Gc.
A enzima "Nagalase" cliva completamente a cadeia lateral do açúcar da proteína Gc: a proteína Gc assim modificada não pode mais ser transformada em proteína Gc-MAF ser realizado.
Em outras palavras, o efeito de Nagalase na proteína Gc significa que o Gc-MAF não pode mais ser formado.
A este respeito, o Nagalase formado por tumores recebe um efeito imunossupressor; ou seja, um efeito que leva à supressão de uma resposta imune.
4. Teste de Nagalase: o que é isso?
Existem procedimentos de teste que podem ser usados para determinar a atividade de Nagalase no soro. O Nagalase é isolado a partir de uma amostra de soro e a atividade enzimática é medida.
Esses processos são referidos como Teste de Nagalase.
Os valores elevados de nagalase no sangue foram descritos em muitas doenças, mas em particular em doenças tumorais.
Os valores de Nagalase aumentados são usados para decidir por um terapia Gc-MAF usado ("indicação de terapia").
Uma diminuição dos valores de nagalase é considerada como uma referência ao sucesso da terapia, em particular na terapia com Gc-MAF ("monitoramento de terapia").
5. Gostaria que o teste Nagalase fosse realizado? Como isso funciona?
Para a prova de Nagalase, uma amostra de sangue (soro) é retirada e embutida. Você encontrará informações sobre a aceitação da amostra abaixo.
Você encontrará um formulário de inscrição para a investigação real no final da brochura.
6. Qual é o custo do teste de Nagalase e como o teste de Nagalase é faturado?
O faturamento é feito para pacientes privados de acordo com o cronograma de tarifas oficiais para médicos (GOÄ).
Infelizmente, este teste da Nagalase atualmente não está coberto por fundos legais de seguro de saúde e pode ter que ser pago pelo próprio paciente. O preço dos auto pagadores é de € 67,04 e corresponde à taxa simples de GOÄ.
7. Gc-MAF produzido artificialmente para o tratamento de doenças
Após o efeito ativador de macrófagos do Gc-MAF, os procedimentos também foram desenvolvidos para: Gc-MAF artificialmente e para usá-lo como uma substância imunoestimuladora.
Esta abordagem terapêutica beneficia do fato de que o Gc-MAF produzido artificialmente não pode ser degradado pelo Nagalase sérico.
Procedimentos de terapia foram, portanto, desenvolvidos em que o GcMAF é produzido artificialmente no laboratório (in vitro) e depois administrado aos pacientes.
8. Que outros valores de medição ainda podem ser relevantes para a terapia com Gc-MAF?
Níveis de vitamina D e cálcio sérico
O efeito ideal de um terapia Gc-MAF parece ser dependente de um ótimo nível de vitamina D. Os valores recomendados são entre 30 e 70 μg / L.
A este respeito, é recomendado antes terapia Gc-MAF para determinar o valor da vitamina D no soro e, se for caso disso, complementar uma terapia com a administração de vitamina D.
Paralelamente, recomenda-se determinar os valores séricos de cálcio para reduzir a dose de vitamina D a um nível elevado de cálcio sérico.
Alguns autores descreveram que o efeito do Gc-MAF depende das variantes genéticas do receptor da vitamina D; os chamados "genótipos VDR". Em particular, as variantes VDR "Fok 1" e "Bsm1" foram examinadas.
O genótipo FF / bb parece ser o melhor terapia Gc-MAF , seguido de Ff / Bb. O genótipo Ff / BB parece ser o pior.
Portanto, a informação sobre o genótipo VDR foi utilizada na terapia Gc-MAF para determinar a dose.
receptor uPA (uPA-R) no soro
Existem publicações que sugerem um papel do chamado "receptor uPA" (uPA-R) no crescimento invasivo de tumores e na formação de metástases. O nível sérico de uPA-R solúvel foi descrito como um fator prognóstico para os tumores.
Em particular, foi descrita uma ligação entre a atividade de Gc-MAF e uPA-R em tumores: Gc-MAF reduziu a quantidade de uPA-R liberada pelas células tumorais.
Alguns cientistas, portanto, recomendam a determinação de uPA-R no soro no contexto de uma Gc-MAF Terapia para doenças tumorais.
Genética da proteína Gc
As variantes genéticas também são descritas para a proteína Gc. A medida em que eles desempenham um papel na otimização da terapia Gc-MAF ainda é objeto de discussões científicas.
9. literatura
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Imunoterapia para câncer de próstata com o fator ativador de macrófagos derivados da proteína Gc, gcMAF
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Imunoterapia de câncer colorretal metastático com factor de ativação de macrófagos com proteína de ligação à vitamina D, GcMAF
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Este trabalho foi retirado pelo editor-chefe da revista "devido a irregularidades na documentação para a aprovação do conselho de revisão institucional
Yamamoto
Factor de ativação de macrófagos derivados da proteína D-binding (GcMAF)
Int J Cancer (2008c) 122: 461-467
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Um papel novo para um componente principal do eixo da vitamina D: o MAF derivado da proteína de ligação à vitamina D induz a apoptose das células do câncer de mama humano através da estimulação de macrófagos
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O valor da alfa-N-acetilgalactosaminidase no soro para avaliação da resposta tumoral à terapia radioativa e fotodinâmica
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Doença de Schindler: a lesão molecular no gene da alfa-N-acetilgalactosaminidase que causa uma distrofia neuroaxonal infantil
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A alfa-N-acetilgalactosaminidase sérica está associada ao diagnóstico / prognóstico de pacientes com carcinoma de células escamosas do colo uterino
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A proteína de ligação à vitamina D - fator ativador de macrófagos (DBP-maf) inibe a angiogênese eo crescimento tumoral em camundongos
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Actividade de células alfa-N-acetilgalactosminidase das células tumorais e seu envolvimento na ativação de macrófagos relacionada ao GcMAF
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Efeitos terapêuticos do GcMAF desglosilado altamente purificado na imunoterapia de pacientes com doenças crônicas
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GcMAF: nossa imunoterapia de próxima geração Nature (2012) 485: S67-S70
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O fator ativador de macrófagos derivado da proteína Gc diminui os níveis de alfa-N-acetilgalactosaminidase em pacientes com câncer avançado OncoImmunologia (2013) 2: e25769
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Actividade fagocítica de macrófagos induzida por soro humano desgalilizados / desialilados contendo degenactosilados / desialilados e atividade antitumoral in vivo Anticancer Res (2013) 33: 2881-2886
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Experiência clínica de imunoterapia interativa contra câncer com GcMAF Anticancer Res (2013) 33: 2917-2920
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Utilidade prognóstica da alfa-N-acetilgalactosaminidase no soro e imunossupressão induzida pela desglicosilação da proteína Gc no soro em pacientes com câncer oral
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10. Explicação de termos importantes
Bsm1 | Bsm1 é uma variante genética do receptor de vitamina D. Para esta variante, são conhecidas três formas: BB, Bb, bb. |
DBP | s. proteína Gc |
galactosamina | Uma molécula de açúcar quimicamente definida. http://de.wikipedia.org/wiki/Galaktosamin |
galactose | Uma molécula de açúcar quimicamente definida. http://de.wikipedia.org/wiki/Galactose |
galactosidase | Uma enzima que corta a galactose. |
Fok1 | Fok1 é uma variante genética do receptor de vitamina D. Três formas são conhecidas por esta variante: FF, Ff, ff. |
Gc-MAF | Também freqüentemente abreviado como "GcMAF" é um fator ativador de macrófagos, que é formado por clivagem parcial da cadeia lateral de açúcar da proteína Gc. A galactose e o ácido sialinico são formados a partir da cadeia lateral do trisacarídeo da proteína Gc, deixando a N-acetilgalactosamina. |
GcMAF | s. Gc-MAF |
proteína Gc | A proteína Gc é uma proteína sérica que tem a capacidade de vincular a vitamina D. Por esse motivo, também é referido como proteína de ligação à vitamina D (DBP). A proteína Gc possui uma cadeia lateral constituída por três açúcares; estes três açúcares são uma galactose, um ácido sialico e uma N-actly-galactosamina. http://de.wikipedia.org/wiki/Vitamin-D-bindendes_Protein |
Goa | Cronograma de tarifas oficiais para médicos; aplica-se ao cálculo do desempenho para pacientes com seguro privado. |
imunossupressão | Supressão significa supressão e imunossupressão significa a supressão de uma resposta imune por diferentes mecanismos, tais como doenças, tratamento com drogas "imunossupressoras" ou certas influências ambientais. O "Nagalase" formado por células tumorais também é atribuído a um efeito imunossupressor. |
MAF | Abreviação do fator de ativação dos macrófagos. Existem vários fatores que podem ativar macrófagos; O Gc-MAF é um deles. |
macrófagos | Os macrófagos (do grego traduzido livremente: "Great-eaters") são Fress-células do sistema imunológico e desempenham um papel em uma defesa-reações do corpo, em particular com a resposta imune. http://de.wikipedia.org/wiki/Makrophagen |
Nagalase | O chamado "Nagalase" é uma enzima específica do corpo, que desempenha um papel no metabolismo do açúcar. O nome cientificamente correto é "N-acetil-galactosaminidase". Nagalase pode separar determinadas moléculas de açúcar, a saber, a N-acetil-galactosamina, de grandes moléculas. |
sialidase | Uma enzima que corta o ácido sialin. |
ácido siálico | Uma molécula de açúcar quimicamente definida. http://de.wikipedia.org/wiki/Sialins%C3%A4ure |
VDR | Abreviação para receptor de vitamina D. O VDR é uma molécula celular e liga a vitamina D. Através desta O efeito da vitamina D na célula é mediado. http://de.wikipedia.org/wiki/Vitamin-D-Rezeptor |
uPA | Abreviação do ativador do plasminogênio do tipo uroquinase, também conhecido como "uroquinase". Esta molécula é um papel no crescimento invasivo de tumores e a formação de metástases. http://de.wikipedia.org/wiki/Urokinase |
uPA-R | Abreviação para "receptor uPA". Esta molécula se liga à superfície das células, incluindo células tumorais uPA e é considerada uma molécula importante no crescimento invasivo de tumores e na formação de metástases. Uma parte do uPA-R derivado do tumor é liberada da célula tumoral e pode ser detectada no soro como a chamada "uPA-R solúvel". O nível sérico do uPA-R solúvel é considerado como marcador tumoral. http://de.wikipedia.org/wiki/Urokinase |
11. Dicas para a coleta de amostras para o teste de Nagalase
O teste de Nagalase é realizado em uma amostra de soro conforme descrito no trabalho original de Yamamoto et al. (veja abaixo "Literatura").
Pelo menos o soro 1 ml é necessário para o ensaio.
A punção venosa remove sangue total do paciente: o soro é obtido de todo o sangue por coagulação e subsequente centrifugação. O paciente deve estar sóbrio.
Para evitar a influência da hemólise induzida pelo transporte, transfira o soro para um tubo neutro após a remoção com o tubo sérico (por exemplo, Soro-Gel-Monovette de Sarstedt ou Serum Vacutainer de BD) e após centrifugação.
Monovetas de gel de soro são centrifugados em 10 xg para minutos de 2.500 (instruções para centrifugação veja abaixo)
As monovetas de gel de soro devem ser armazenadas para os primeiros minutos de 15 após a amostragem de sangue em pé para a coagulação, uma vez que, de outra forma, ocorre uma "formação de salsicha". Esta formação de salsicha evita a formação da camada de separação de gel durante a centrifugação e, portanto, a separação ideal de bolos de sangue e soro, especialmente no caso de rotores rígidos.
IMPORTANTE: soros de turbidez (lipídios?) E os soros hemolíticos (coloração vermelha) não podem ser analisados no teste de Nagalase. Portanto (como já mencionado acima) é aconselhável reduzir o peso do paciente.
Envie o soro preenchido com o formulário de solicitação preenchido (veja abaixo) em um recipiente de transporte estável para o seguinte endereço:
Prof. Dr. med. M. Kramer
Postfach 103320
D-69023Heidelberg
Kontakt:
Tel .: 06221 4340 963
Fax: 06221 4340 964
12. Notas sobre a centrifugação de monovetas de gel
A velocidade necessária para atingir o número G (aceleração centrífuga relativa [RZB]) depende do raio da centrífuga. Quando "r" é o raio em cm e "n" é as revoluções / min, a seguinte equação aplica-se à aceleração centrífuga relativa (RZB) em "g" (DIN 58970-2):
No site da Sarstedt (www.sarstedt.com; Fig. 2 abaixo), você encontrará as informações sobre os tubos de coleta e uma calculadora com a qual você pode determinar a velocidade necessária da sua centrífuga.
Após a centrifugação, a camada de gel deve encontrar-se sobre o bolo de sangue integral e não estar mais presente entre o bolo sanguíneo e o soro. Isso sempre é garantido com rotores bucking.
Se houver alguma dúvida quanto à questão de saber se a camada de gel separa o bolo de sangue do soro após a centrifugação, o soro deve ser transferido para um tubo neutro, pipetado ou derrubado. Isto é especialmente recomendado para rotores rígidos.

Fonte: www.sarstedt.com

Fonte: www.sarstedt.com
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