GcMAF navorsing en verwysings

GcMAF (Gc proteïen afgeleide makrofage aktiverende faktor) vir die behandeling van kanker, MIV en immuunsiektes

Navorsing en verwysings

GcMAF (afgelei van Gc proteïen makrofaag aktiveer faktor)

Vir die behandeling van kanker, MIV en immuun siektes

Navorsing en verwysings

toetsverslag

14-Junie-2012 stabiliteit van GcMAF in serum (PDF)

H Mukai, Y Uto. Departement van Biologiese Wetenskap en Tegnologie, Universiteit van Tokushima.

  • Hierdie eksperiment is uitgevoer by die Universiteit van Tokushima in Japan aan die kort en lang termyn raklewe en stabiliteit van die fagositiese aktiwiteit van makrofage ons GcMAFs die 2. tot geslag demonstreer. Die resultate dui daarop dat die 2. Generasie GcMAF in serum vir 1 jaar 4ºC vir 14 dae by kamertemperatuur (ongeveer 20ºC) en 7 dae by 40ºC bly stabiel.
  • Neem asseblief kennis dat hierdie navorsing en die verwante resultate slegs van toepassing op die GcMAF die tweede generasie, wat voorberei is deur ons gepatenteerde produksie proses, Konvensionele GcMAF, wat geproduseer word deur die gebruik van die vitamien D-affiniteit, nie dieselfde stabiliteit as die GcMAF het die tweede generasie, want dit het 'n hoër oksidasie neiging. Die verskil in die stabiliteit is te danke aan die verskillende produksie prosesse en nie as gevolg van die GcMAF self.

die tweede generasie van GcMAF fagositiese makrofaag aktiwiteit toets

die tweede generasie GcMAF is getoets vir die fagositiese aktiwiteit van makrofage met die muis makrofage en skape rooibloedselle aan die Universiteit van Tokushima. Die rooibloedselle opsonized en dus gemerk vir geaktiveerde makrofage vir inname en verwoesting. Die opsonized selle waargeneem kan word as pers areas in die helder selle. Op grond van hierdie waarneming, bereken ons die fagositose (inname) indeks (PI).

Die pers gemerk makrofage geaktiveer deur GcMAF en dan neem die opsonized rooibloedselle (hier in wit verf punte).

Voorlopige resultate van die uitvoering in vivo eksperimente op muise kanker

In vivo eksperimente van kanker met muise behandel met tweede-generasie GcMAF en gesuiwerde GcMAF wat voorberei is deur die metode van Dr. Yamamoto met behulp van 'n sout uitgevoer. Die 2. Generasie het in hierdie eksperimente as 'n baie meer doeltreffend as gesuiwer GcMAF uit. (Ongepubliseerde resultate, Universiteit van Tokushima).

Gepubliseerde navorsing oor GcMAF

Saam met navorsers van die Universiteit GcMAF Tokushima in Japan wiird werk op die verdere ontwikkeling van die tweede generasie GcMAF. Hier is 'n navorsing verslae oor GcMAF wat binne die laaste jaar 10 van die Universiteit van Tokushima gepubliseer en gepubliseer in wetenskaplike tydskrifte. Navorsing oor GcMAF vorder en sal lei in die toekoms na ander publikasies.

2010 vitamien D-bindende proteïen inhibeer makrofaag aktiveer faktor HCC in SCID muise

K Nakayama, N Matsuura, T Kanematsu, H. Fujioka, H. Nakayama, N Matsuura, Kanematsu, H. Fujioka.

  • Agtergrond, Die waarskynlike terugval van hepatocellular karsinoom is die grootste probleem vir die behandeling van hierdie. Dus, 'n nuwe strategie vir die behandeling van die siekte word vereis. Die doel van hierdie studie was om vas te stel of die vitamien-D bindende proteïen makrofaag aktiveer faktor (DBPmaf) die groei van HCC kan inhibeer.
  • gevolgtrekking, DBP-MAF het ten minste twee nuwe funksies, naamlik die anti-angio aktiwiteit en gewas vernietiging deur die aktivering van makrofage. dus DBP-MAF is 'n potensiële nuwe strategie vir die behandeling van HCC.

Figuur 2 verteenwoordiger gewasse uit 21 dae na die aanvang van administrasie van DBP-MAF. (Dosis: 40 ng / kg / dag)

 

Figuur 3 veranderinge in die volume van gewasse (N = 10) 21 dag ná die aanvang van behandeling. Die gewasse gegroei ongemerk in die kontrole groep, terwyl die tumor groei van die toets groep aansienlik beperk.

 

Figuur 4 aantal microvessels binne die oorgeplant gewasse HepG2. Die aantal microvessels in die gewasse van behandelde muise was aansienlik laer as dié van onbehandelde gewasse.

 

Skrywer se kommentaar:

Hepatocellular karsinoom (HCC) is die mees algemene maligniteite wêreldwyd. Die terapeutiese opsies vir die behandeling van HCC is beperk en dikwels versprei, selfs nadat genesende behandelings, terugvalle uit. Soliede gewasse, insluitend HCC moet 'n voldoende vaskulêre netwerk te ontwikkel en sodoende hulself te voorsien van kos. sodat tumor angiogenese is een van die basiese voorwaardes vir tumor groei en verspreiding.

Ons het vroeër berig dat die vitamien D bindende proteïen (DBP) afgelei makrofaag aktiveer faktor is 'n inhibitor van angiogenese. Dit is gevind op 'n natuurlike basis in die menslike Bach speekselklier kanker sel lyn ByPC-3.

Dit in vivo studie toon dat DBPmaf die tumor progressie van xenografierten HCC selle in SCID muise kan verminder. Die in vitro studie toon ook dat DBP-MAF het ten minste twee biologiese funksies; insluitend anti angio ander aktiwiteit en die verbetering van makrofaag aktivering.

Die anti-angiogenese is een van die mees doeltreffende metodes om tumor regressie of ten minste 'n groei in hegtenis veroorsaak. Ander verslae bevestig die aanname dat DBP-MAF is anti-angio en verhinder die groei van HCC in muise.

Verslae aan hepatocellular karsinoom MVD en VEGF vlakke in die serum en tumor weefsel te verhoog. Bevacizumab (Avastin, 'n gehumaniseerd anti-VEGF muis monoklonale teenliggaampies) is klinies gebruik word vir die behandeling van kolonkanker. Verskeie studies het die gebruik van bevacizumab as 'n enkele behandeling agent of in kombinasie met sitotoksiese of molekulêre georiënteerde agente in pasiënte met gevorderde HCC ondersoek. Dit het getoon dat DBP-MAF oefen sy anti-angio effek op 'n wyse soortgelyk aan Bevacizumab deur die inhibisie van VEGF sein waterval. Wys al hierdie resultate toon dat DBP-MAF is 'n belowende angiogenese remmer, en verdere navorsing oor die meganisme van aksie is nodig.

Ons huidige studies toon dat DBP-MAF veroorsaak 'n massiewe insypeling van makrofage in die oorgeplant HCC selle en daarna geaktiveerde makrofage as antigeen aanbieding selle om tumor antigene. sodat hierdie makrofage optree nie net as ingebore immuun selle, maar ook funksioneer as dendritiese selle.

Die feit dat ons geen anti-proliferatiewe effek van DBP-MAF op HCC selle het, dit dui daarop dat DBP-MAF hoofsaaklik werk deur inhiberende angiogenese en die doodmaak van tumorselle deur geaktiveerde makrofage.

Ons het gewys vir die eerste keer dat die behandeling van SCID muise met onderhuidse lei HepG2 deur DBP-MAF vir tumor groei onderdrukking.

2005 Gc proteïen (Vitamien D bindende proteïen): Gc genotipering en GcMAF basis aktiwiteit

H Nagasawa, Y Uto, H Sasaki, N Okamura, 'n Murakami, S Kubo, KL Kirk, H Hori.

Opsomming, Die Gc proteïen (menslike groep-spesifieke komponent (GC), 'n vitamien D-bindende proteïen of Gc-globulien) het belangrike fisiologiese funksies, insluitend deelname in die vitamien D vervoer en sy bewaring, skoonmaak van ekstrasellulêre G-aktien, die wins van die chemo aktiwiteit van C5a (vir neutrofiele in inflammasie en makrofaag aktivering bemiddel deur 'n GalNAc verander Gc proteïen (GcMAF). hierdie oorsig toon die struktuur en funksie van Gc proteïen is veral in die lig van die Gc genotipering en GcMAF basis aktiwiteit ondersoek. 'n bespreking van die navorsingstrategie "GcMAF as 'n teiken vir dwelm ontdekking" is gebaseer op ons eie navorsing.

2004 Vereniging van makrofaag aktiveer faktor (MAF) basis aktiwiteit met polimorfisme in die vitamien-D bindende proteïen (PDF)

H Nagasawa, S Saki, Y Uto, S Kubo, H Hori.

Opsomming, Agtergrond. Serum vitamien-D bindende proteïen (gC proteïen of DBP) is 'n hoogs uitgedruk polimorfiese proteïen deur 'n waterval van koolhidrate verwerking reaksies van die voorloper van inflammasie präparierenden makrofaag aktiveer faktor (GcMAF). Om die verhouding tussen Gc polimorfisme en GcMAF basis aktiwiteit toe te lig, het ons beraam dat die fagositiese vermoë van Homo drie tipes Gc proteïen Gc1f-1F, Gc1s-1S en Gc2-2 uit deur verwerking van hul koolhidrate helftes.

Proses, Ons verrig die Gc-tik van menslike serum monsters deur isoelektriese fokus (IEF). Die Gc proteïen uit menslike serum is gesuiwer deur affiniteitschromatografie met 25-hydroxyvitamine D3 sepharose. A fagositose toets van Gc proteïene verander met behulp van beta-glycosidase en sialidase is uitgevoer.

Resultate, Deur die ontleding van die basismateriaal GcMAF aktiwiteit met behulp van beta1-4-koppeling-spesifieke galaktosidase van bone het getoon dat die Gc1F-1F fenotipe bevat die Galbeta1-4GalNAc band. Die GcMAF basis aktiwiteit van Gc1F-1F fenotipe was die hoogste onder die drie Gc Homo spesies.

gevolgtrekking, Die Gc polimorfisme en die koolhidrate verskeidenheid van Gc proteïen is belangrik vir die pleiotropic effekte.

2003 karakterisering van die menslike van Gc-proteïen afgelei makrofaag aktiveer faktor (GcMAF) en sy funksionele rol in die tumorous makrofaag aktiwiteit (PDF)

S Mohamad, Hori H, H Nagasawa, K Usui, Y Uto.

Einführung, Makrofage is noodsaaklik vir immuunstelsel die liggaam en speel 'n belangrike rol in die immuunrespons te bedreiging seine. Makrofage is ook bekend as 'n kritieke rol in A. procumbens immuniteit het, kan infiltreer die gewas en dus kan gevind word in die meeste gewas webwerwe. Intussen het die Gc-serum proteïen geld (ook bekend as-vitamien bindende proteïen bekend D3) as gevolg van die multi-funksionele eienskappe as 'n voorloper vir makrofaag aktiveer faktor. Die Gc proteïen kan 'n induseerbare B-galaktosidase en neuraminidase van B-selle deur T selle wees om 'n kragtige makrofaag aktiveer faktor (GcMAF), 'n proteïen met N-acetylgalactosamine (GalNAc) die balans synde komponent suiker omgesit.

Geaktiveerde makrofage druk 'n gewas aktiwiteit deur inlywing van tumorselle, die vrylating van reaktiewe suurstof spesies (ROS) en reaktiewe stikstof spesies (RNS), of beide. Ons berig dat in situVerandering van Gc proteïen met B-galaktosidase en neuraminidase verhoog die vrystelling van superoksied in thioglycolate van peritoneale makrofage van muise. Yamamoto et al. het die moontlikheid van die gebruik GcMAF as immunomodulator vir die behandeling van kanker. Vandaar die behoefte aan 'n toets vir GcMAF. Kanan et al. berig op die kwantitatiewe analise van GcMAF van menslike serum. Die suiker inhoud van GcMAF is nooit kwalitatief ondersoek. Hier bied ons die studie op die kwalitatiewe ontleding van GcMAF van gesuiwerde menslike serum en die uitwerking daarvan op makrofaag aktiwiteit.

2003 van Gc-proteïen afgelei makrofaag aktivering faktor (GcMAF): isoelektriese fokus patrone en tumorous aktiwiteit (PDF)

S Mohamad, Nagasawa H, S Saki, Y Uto, Y Nakagawa, K Kawashima, H Hori.

Agtergrond, GC proteïen is die voorloper van die GC-proteïen afgelei makrofaag aktiveer faktor (GcMAF) met die drie fenotipes: Gc1f, Gc1s en Gc2, gebaseer op die huidige elektroforetiese mobiliteit. Die verskil in elektroforetiese mobiliteit is te danke aan die verskillende post-translasionele samestelling van die suiker moiety.

Materiale en metodes. Ons vergelyk die verskil in elektroforetiese mobiliteit tussen die Gc proteïen en GcMAF op die basis van isoelektriese fokus (IEF) metode. Die tumorale aktiwiteit van makrofage behandel met GcMAF is geëvalueer deur die mede-kultuur met L-929 selle. Die tumorous meganisme is met die TNF bioassay en stikstofoksiede (GEEN) vrylating ondersoek.

Resultate, A verskil in die elektroforetiese mobiliteit van die Gc proteïen en GcMAFs kon opgespoor word nie. Hoewel die tumorale aktiwiteit van GcMAF behandel makrofage is bespeur, is geen vrystelling van TNF en GEEN getoon.

gevolgtrekking, Die verskil van isoelektriese fokus mobiliteit wanneer Gc proteïen en GcMAF nuttig om 'n GcMAF opsporing metodes ontwikkel kan word. GcMAF toegeneem makrofaag tumor aktiwiteit. Maar die TNF en geen vrystelling is nie betrokke in die meganisme.

2002 tumorselle alfa-N-acetylgalactosaminidase aktiwiteit en hul betrokkenheid in die GcMAF-verwante makrofaag aktivering (PDF)

S Mohamad, Nagasawa H, Y Uto, H Hori.

Opsomming, Die opeenhoping van alfa-N-asetiel galactosaminidase (alfa-Nagalase) in die serum van kankerpasiënte en die deglycosylation van Gc proteïen wat is 'n voorloper van GcMAF-geïnduseerde makrofaag aktivering waterval wat uiteindelik lei tot immuunonderdrukking in gevorderde kankerpasiënte is gedemonstreer.

Ons bestudeer die biochemiese karakterisering van alfa-Nagalase van verskeie menslike tumor sellyne. Ons het ook ondersoek om die uitwerking op die doeltreffendheid van GcMAF muis peritoneale makrofage in staat te stel. Dit is tydens die makrofaag aktivering waterval geïnisieer deur GcMAF na aktivering van superoksied te vervaardig.

Die spesifieke aktiwiteit van alfa-NaGalases van menslike kolon tumor sel lyn HCT116, menslike hepatoma sellyne HepG2, en normale lewerselle menslike (Chang Leber sel lyn) is geëvalueer deur gebruik te maak van twee soorte materiale; GalNAc alfa-PNP (Eks-substraat) en Gal-beta-GalNAc alfa-PNP (endo-substraat).

-Gewas afkomstig alfa-Nagalase het 'n hoër aktiwiteit as normale alfa-Nagalase op, het 'n hoër substraat spesifisiteit aan die exo-tipe substraat as die endo-substraat en die aktiwiteit van behoue ​​by pH7. GcMAF versterk superoksied produksie van die muis makrofaag, waarin die pre-behandeling van tumorcel lysate met GcMAF verminder die aktiwiteit.

Ons aflei dat-tumor afgelei alfa-Nagalase verskil in die biochemiese karakterisering in vergelyking met normale alfa-Nagalase van normale Chang lewerselle. Daarbenewens het die wat uit die tumor sel alfa-Nagalase verminder die aktivering sterkte van GcMAF met betrekking tot die makrofaag.

2002 voorbereiding van die Gc-proteïen afgelei makrofaag aktivering faktor (GcMAF) en die struktuur daarvan karakterisering en biologiese aktiwiteit (PDF)

S Mohamad, Nagasawa H, Y Uto, H Hori.

Opsomming, Agtergrond. GC proteïen is 'n voorloper van die GC-proteïen afgelei makrofaag aktiveer faktor (GcMAF) in die gang gesit word deur inflammasie makrofaag aktivering waterval. 'N induseerbare beta-galaktosidase en neuraminidase van B-selle deur T selle vat Gc proteïen te GcMAF.

Resultate, Ons het met sukses skoongemaak Gc proteïen uit menslike serum. GcMAF is waargeneem deur Lektinblotting en het 'n hoë biologiese aktiwiteit.

gevolgtrekking, Ons resultate ondersteun die belangrikheid van die terminale N-acetylgalactosamine eenheid in GcMAF-bemiddelde makrofaag aktivering waterval en die bestaan ​​van konstitutiewe GcMAF in menslike serum. Hierdie voorlopige data is belangrik vir die ontwerp van molekulêre GcMAFs.

Ander gepubliseerde navorsing oor Gc-MAF

2011 polimorfisme in die vitamien D-bindende proteïen as 'n genetiese risiko faktor in die patogenese van endometriose (PDF)

K vesel lengte, G. Golderer, L. Kremser, H. Lindner, B. Coffin, L. Wildt, B. Seeber.

Opsomming, Vorige studies het 'n gebrek aan inflammatoriese reaksie in vroue wat endometriose enwickeln getoon. Die spesifieke immunologiese tekortkominge kan nie ten volle nog verduidelik word.

doel, Ons doel was om verskille in proteïen uitdrukking in die serum te identifiseer, en dan skyn op die patofisiologie van endometriose nader.

metode, Die deursnee-studie is gehou by 'n universiteit hospitaal en ondersoek die vroue wat ondergaan het tussen 2003 en 2005 laparoskopie. Hierdie pasiënte is vroue tussen die ouderdomme van 18-49 jaar, wat 'n operasie ondergaan het as gevolg van pyn en / of onvrugbaarheid of elektiewe Tubal afbinding. Die bloed is preoperatief ingesamel.

Main uitkoms van die aksie, Proteoomanalise van die serum is uitgevoer deur twee-dimensionele Differenzgelelektrophorese.

Resultate, Ons het gevind dat 25 proteïen kolle met 'n beduidende verskil in oorvloed tussen vroue met endometriose en beheer, insluitend akute fase proteïen en aanvullende komponente. Die aantal vitamien-D bindende proteïen was hoër in al endometriose poele met 'n faktor van ongeveer 3 in vergelyking met die kontrole swembad. Die analise van spesifieke Allelprodukten behulp nanoskaal vloeistofchromatografie-elektrosproei ionisasie massaspektrometrie het getoon dat dit was die GC * 2-Allelprodukt wat meer gekonsentreerde in serum poele en in individuele validering monsters in vroue met endometriose was. In teenstelling met die GC * 1-Allelprodukt wat maklik in 'n kragtige makrofaag faktor (gC proteïen-afgeleide makrofaag aktiveer faktor) omskep kan word, dit is die GC * 2-Allelprodukt prakties nie bestaan ​​nie.

gevolgtrekkings, Ons vermoed dat die gebrek aan fagositiese funksie van die aktivering van makrofage met diegene wat die GC * 2 polimorfisme te inplanting (algemeen in endometriose) dra, skep die moontlikheid endometriotic weefsel in die buikholte. Toekomstige studies aan die spesifieke vitamien D-bindende proteïen polimorfismes as risikofaktore vir endometriose in groter bevolkings te evalueer van vroue nodig.

Skrywer se kommentaar:

Endometriose is 'n algemene siekte van vroue van reproduktiewe ouderdom. Dit raak oor 10% van vroue en meer as 40% van vroue met onvrugbaarheid. Vroue met endometriose kan 'n inkorting van hul immuunstelsel versteurings en inflammatoriese reaksies het, sodat endometriotic letsels ontwikkel.

Ons mees indrukwekkende ontdekking is die wisselende frekwensie van 'n spesifieke alleel van DBP, meer presies die GC * 2 alleel. Die uitdrukking van die GC * 2-Allelprodukts was hoër as in die kontrolegroep in alle endometriose poele 3-vou.

DBP is bykomend tot die rol as 'n draer vir vitamien D metaboliete, die sterkste aktiveerder van makrofage in die vorm van Gc proteïen-afgeleide makrofaag aktiveer faktor (GcMAF). Die GC * 1-Allelprodukte% is geglikosileerd met 'n totale koers van 10-30 terwyl die GC * 2-Allelprodukt is geglikosileerd teen 'n koers van 1-5%. So, die vorm van die proteïen ingebou deur die GC * 1 alleel DBP is baie makliker omskep in GcMAF, terwyl dit neem skaars plek in gekodeerde GC * 2 alleel.

Pasiënte met net GC * 2-Allelprodukten is buite verhouding verteenwoordig in die endometriose groep en het 'n aansienlik verminder vermoë om DBP in GcMAF om die kritieke makrofaag aktiveerder omskep.

Gebaseer op die resultate van ons studie, stel ons voor dat die immuniteitsgebrek wat minstens deels te wyte aan die onvermoë om allele GC'2 om die fagositiese funksie van makrofage aktiveer.

Aktivering van makrofage deur spesifieke immunotherapie in geaffekteerde vroue kan die basis van 'n nuwe behandeling strategie vir endometriose te vorm.

Het u vrae?

Kontak ons ​​asseblief.